Departamento de Medicina de Laboratorio, Hospital Popular de la Región Autónoma de Guangxi Zhuang, Nanning, China
Departamento de Medicina de Laboratorio, Hospital Afiliado de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shandong, Jinan
Huang Huayi, Escuela de Medicina de Laboratorio, Universidad Médica Nacional de Youjiang, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, Nueva Jersey, 07430, EE. UU.
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Huang Huayi, Escuela de Medicina de Laboratorio, Universidad Médica Nacional de Youjiang, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, Nueva Jersey, 07430, EE. UU.
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Para comprender mejor los cambios patológicos de COVID-19, es propicio el manejo clínico de la enfermedad y la preparación para la ola de pandemias similares en el futuro.
Se analizaron retrospectivamente los parámetros hematológicos de 52 pacientes con COVID-19 ingresados en hospitales designados.Los datos se analizaron utilizando el software estadístico SPSS.
Antes del tratamiento, los subconjuntos de células T, los linfocitos totales, el ancho de distribución de glóbulos rojos (RDW), los eosinófilos y los basófilos fueron significativamente más bajos que después del tratamiento, mientras que los indicadores de inflamación de neutrófilos, neutrófilos y linfocitos La relación (NLR) y la proteína C β-reactiva ( Los niveles de CRP), así como los glóbulos rojos (RBC) y la hemoglobina, disminuyeron significativamente después del tratamiento.Los subconjuntos de células T, los linfocitos totales y los basófilos de los pacientes graves y en estado crítico fueron significativamente más bajos que los de los pacientes moderados.Los neutrófilos, NLR, eosinófilos, procalcitonina (PCT) y CRP son significativamente más altos en pacientes graves y críticos que en pacientes moderados.Los CD3+, CD8+, linfocitos totales, plaquetas y basófilos de los pacientes mayores de 50 años son más bajos que los de los menores de 50 años, mientras que los neutrófilos, NLR, CRP, RDW en los pacientes mayores de 50 años son más altos que los de los menores de 50 años.En pacientes graves y críticos, existe una correlación positiva entre el tiempo de protrombina (PT), la alanina aminotransferasa (ALT) y la aspartato aminotransferasa (AST).
Los subconjuntos de células T, el recuento de linfocitos, RDW, neutrófilos, eosinófilos, NLR, CRP, PT, ALT y AST son indicadores importantes en el manejo, especialmente para pacientes graves y críticos con COVID-19.
La pandemia de la enfermedad por coronavirus de 2019 (COVID-19) causada por un nuevo tipo de coronavirus estalló en diciembre de 2019 y se propagó rápidamente por todo el mundo.1-3 Al comienzo del brote, el enfoque clínico se centró en las manifestaciones y la epidemiología, combinado con tomografía computarizada para obtener imágenes de los pacientes 4 y 5, y luego se diagnosticó con resultados positivos de amplificación de nucleótidos.Sin embargo, posteriormente se encontraron diversas lesiones patológicas en diferentes órganos.6-9 Cada vez más evidencias muestran que los cambios fisiopatológicos de la COVID-19 son más complicados.El ataque del virus provoca daños en múltiples órganos y el sistema inmunitario reacciona de forma exagerada.Se han observado aumentos en las citoquinas séricas y alveolares y proteínas de respuesta inflamatoria7, 10-12, y se han encontrado linfopenia y subconjuntos de células T anormales en pacientes críticos.13, 14 Se informa que la proporción de neutrófilos a linfocitos se ha convertido en un indicador útil para distinguir nódulos tiroideos malignos y benignos en la práctica clínica.15 NLR también puede ayudar a distinguir a los pacientes con colitis ulcerosa de los controles sanos.16 También juega un papel en la tiroiditis y está asociado con la diabetes tipo 2.17, 18 RDW es un marcador de eritrocitosis.Los estudios han encontrado que ayuda a distinguir los nódulos tiroideos, diagnosticar la artritis reumatoide, la enfermedad del disco lumbar y la tiroiditis.19-21 La PCR es un predictor universal de inflamación y ha sido estudiada en muchos casos.22 Recientemente se ha descubierto que NLR, RDW y CRP también están involucrados en COVID-19 y juegan un papel importante en el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad.11, 14, 23-25 Por lo tanto, los resultados de los exámenes de laboratorio son importantes para evaluar el estado del paciente y tomar decisiones de tratamiento.Analizamos retrospectivamente los parámetros de laboratorio de 52 pacientes con COVID-19 que fueron hospitalizados en hospitales designados en el sur de China de acuerdo con su pre y post tratamiento, gravedad y edad, para comprender mejor los cambios patológicos de la enfermedad y ayudar al manejo clínico futuro. de COVID-19.
Este estudio realizó un análisis retrospectivo de 52 pacientes con COVID-19 ingresados en el hospital designado Nanning Fourth Hospital desde el 24 de enero de 2020 hasta el 2 de marzo de 2020. Entre ellos, 45 estaban moderadamente enfermos y 5 estaban gravemente enfermos.Por ejemplo, la edad va desde los 3 meses hasta los 85 años.En cuanto al género, había 27 hombres y 25 mujeres.El paciente tiene síntomas como fiebre, tos seca, fatiga, dolor de cabeza, dificultad para respirar, congestión nasal, secreción nasal, dolor de garganta, dolor muscular, diarrea y mialgia.La tomografía computarizada mostró que los pulmones estaban parcheados o en vidrio esmerilado, lo que indica neumonía.Diagnostique de acuerdo con la séptima edición de las Pautas chinas de diagnóstico y tratamiento de COVID-19.Confirmado por detección qPCR en tiempo real de nucleótidos virales.Según los criterios diagnósticos, los pacientes se dividieron en grupos moderados, graves y críticos.En casos moderados, el paciente desarrolla fiebre y síndrome respiratorio, y los hallazgos de imagen muestran patrones de neumonía.Si el paciente cumple alguno de los siguientes criterios, el diagnóstico es grave: (a) dificultad respiratoria (frecuencia respiratoria ≥30 respiraciones/min);(b) saturación de oxígeno en la sangre del dedo en reposo ≤93%;(c) presión de oxígeno arterial (PO2) )/fracción inspiratoria O2 (Fi O2) ≤300 mm Hg (1 mm Hg = 0,133 kPa).Si el paciente cumple alguno de los siguientes criterios, el diagnóstico es grave: a) insuficiencia respiratoria que requiere ventilación mecánica;(b) choque;(c) insuficiencia de otros órganos que requiere tratamiento en la unidad de cuidados intensivos (UCI).De acuerdo con los criterios anteriores, 52 pacientes fueron diagnosticados como gravemente enfermos en 2 casos, gravemente enfermos en 5 casos y moderadamente enfermos en 45 casos.
Todos los pacientes, incluidos los pacientes con enfermedades moderadas, graves y críticas, son tratados de acuerdo con los siguientes procedimientos básicos: (a) Terapia adyuvante general;(b) Terapia antiviral: lopinavir/ritonavir y α-interferón;(c) La dosis de la fórmula de la medicina tradicional china se puede ajustar de acuerdo con la condición del paciente.
Este estudio fue aprobado por el Comité de Revisión del Instituto de Investigación del Cuarto Hospital de Nanning y se utilizó para recopilar información del paciente.
Análisis de hematología de sangre periférica: el análisis de hematología de rutina de sangre periférica se realiza en el analizador de hematología Mindray BC-6900 (Mindray) y el analizador de hematología Sysmex XN 9000 (Sysmex).La muestra de sangre anticoagulante con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) en ayunas se recogió la mañana siguiente al ingreso del paciente en el hospital.La evaluación de la consistencia entre los dos analizadores de sangre anteriores se verificó de acuerdo con los procedimientos de control de calidad del laboratorio.En el análisis de hematología, el recuento y la diferenciación de glóbulos blancos (WBC), el índice y los glóbulos rojos (RBC) se obtienen junto con diagramas de dispersión e histogramas.
Citometría de flujo de las subpoblaciones de linfocitos T: se usó el citómetro de flujo BD (Becton, Dickinson and Company) FACSCalibur para el análisis de citometría de flujo para analizar las subpoblaciones de células T.Analice los datos mediante el software MultiSET.La medición se llevó a cabo de acuerdo con los procedimientos operativos estándar y las instrucciones del fabricante.Utilice un tubo de recogida de sangre anticoagulada con EDTA para recoger 2 ml de sangre venosa.Mezcle suavemente la muestra girando el tubo de muestra varias veces para evitar la condensación.Después de recolectada la muestra, se envía al laboratorio y se analiza dentro de las 6 horas a temperatura ambiente.
Análisis de inmunofluorescencia: la proteína C reactiva (PCR) y la procalcitonina (PCT) se analizaron inmediatamente después de la finalización del análisis utilizando muestras de sangre analizadas por hematología y analizadas en el analizador de inmunofluorescencia FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD.) en el analisis.) Siga las instrucciones del fabricante y las normas de procedimiento de laboratorio.
Analice la alanina aminotransferasa (ALT) y la aspartato aminotransferasa (AST) séricas en el analizador químico HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).El tiempo de protrombina (PT) se analizó en el analizador STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
Reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcripción inversa (RT-qPCR): use plantillas de ARN aisladas de hisopos nasofaríngeos o secreciones del tracto respiratorio inferior para realizar RT-qPCR para detectar el SARS-CoV-2.Los ácidos nucleicos se separaron en la plataforma de separación automática de ácidos nucleicos SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).El kit de detección fue proporcionado por Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. y Shanghai BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. El ciclo térmico se realizó en un termociclador ABI 7500 (Applied Biosystems).Los resultados de las pruebas de nucleósidos virales se definen como positivos o negativos.
Para el análisis de los datos se utilizó el software SPSS versión 18.0;Se aplicaron la prueba t para muestras pareadas, la prueba t para muestras independientes o la prueba U de Mann-Whitney, y se consideró significativo un valor de p < 0,05.
Cinco pacientes en estado crítico y dos pacientes en estado crítico eran mayores que los del grupo moderado (69,3 frente a 40,4).La información detallada de 5 pacientes en estado crítico y 2 pacientes en estado crítico se muestra en las Tablas 1A y B. Los pacientes con enfermedad grave y en estado crítico suelen tener bajos subconjuntos de células T y recuentos totales de linfocitos, pero el recuento de glóbulos blancos es más o menos normal, excepto para los pacientes con glóbulos blancos elevados (11,5 × 109/L).Los neutrófilos y los monocitos también suelen estar elevados.Los valores séricos de PCT, ALT, AST y PT de 2 pacientes en estado crítico y 1 paciente en estado crítico fueron altos, y los valores de PT, ALT, AST de 1 paciente en estado crítico y 2 pacientes en estado crítico se correlacionaron positivamente.Casi todos los 7 pacientes tenían niveles altos de PCR.Los eosinófilos (EOS) y los basófilos (BASO) tienden a ser bajos en pacientes en estado crítico y en estado crítico (Tabla 1A y B).La Tabla 1 enumera la descripción del rango normal de parámetros hematológicos en la población adulta china.
El análisis estadístico mostró que antes del tratamiento, las células T CD3+, CD4+, CD8+, los linfocitos totales, el ancho de distribución de RBC (RDW), los eosinófilos y los basófilos fueron significativamente más bajos que después del tratamiento (P = .000, .000, .000, .012, . 04, .000 y .001).Los indicadores inflamatorios neutrófilos, relación neutrófilos/linfocitos (NLR) y CRP antes del tratamiento fueron significativamente más altos que después del tratamiento (P = 0,004, 0,011 y 0,017, respectivamente).La Hb y los RBC disminuyeron significativamente después del tratamiento (P = 0,032, 0,026).El PLT aumentó después del tratamiento, pero no fue significativo (p = 0,183) (tabla 2).
Los subconjuntos de células T (CD3+, CD4+, CD8+), linfocitos totales y basófilos de pacientes graves y en estado crítico fueron significativamente más bajos que los de pacientes moderados (P = 0,025, 0,048, 0,027, 0,006 y 0,046).Los niveles de neutrófilos, NLR, PCT y CRP en pacientes graves y en estado crítico fueron significativamente más altos que los de pacientes moderados (P = 0,005, 0,002, 0,049 y 0,002, respectivamente).Los pacientes graves y críticamente enfermos tenían un PLT más bajo que los pacientes moderados;sin embargo, la diferencia no fue estadísticamente significativa (Cuadro 3).
Los CD3+, CD8+, linfocitos totales, plaquetas y basófilos de los pacientes mayores de 50 años fueron significativamente más bajos que los de los pacientes menores de 50 años (p = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 y 0,039, respectivamente), mientras que los mayores Los neutrófilos, la relación NLR, los niveles de CRP y el ADE de los pacientes de 50 años fueron significativamente más altos que los de los pacientes menores de 50 años (P = 0,0191, 0,015, 0,009 y 0,010, respectivamente) (Tabla 4).
COVID-19 es causado por la infección con el coronavirus SARS-CoV-2, que apareció por primera vez en Wuhan, China, en diciembre de 2019. El brote de SARS-CoV-2 se propagó rápidamente después y condujo a una pandemia mundial.1-3 Debido al conocimiento limitado de la epidemiología y patología del virus, la tasa de mortalidad al comienzo del brote es alta.Aunque no existen medicamentos antivirales, la gestión de seguimiento y el tratamiento de COVID-19 ha mejorado mucho.Esto es especialmente cierto en China cuando las terapias adyuvantes se combinan con la medicina tradicional china para tratar casos tempranos y moderados.26 pacientes con COVID-19 se han beneficiado de una mejor comprensión de los cambios patológicos y los parámetros de laboratorio de la enfermedad.enfermedad.Desde entonces, la tasa de mortalidad ha disminuido.En este informe, no hubo muertes entre los 52 casos analizados, incluidos 7 pacientes graves y críticos (Tabla 1A y B).
Las observaciones clínicas han encontrado que la mayoría de los pacientes con COVID-19 tienen subpoblaciones de linfocitos y células T reducidas, que están relacionadas con la gravedad de la enfermedad.13, 27 En este informe, se encontró que las células T CD3+, CD4+, CD8+, linfocitos totales, RDW antes del tratamiento, eosinófilos y basófilos fueron significativamente más bajos que después del tratamiento (P = .000, .000, .000, .012, .04, .000 y .001).Nuestros resultados son similares a informes anteriores.Estos informes tienen importancia clínica en el seguimiento de la gravedad de COVID-19.8, 13, 23-25, 27, mientras que los indicadores inflamatorios neutrófilos, relación neutrófilos/linfocitos (NLR) y CRP después del pretratamiento que del tratamiento (P = .004, . 011 y .017, respectivamente), que se han notado y reportado previamente en pacientes con COVID-19.Por lo tanto, estos parámetros se consideran indicadores útiles para el tratamiento de COVID-19.8.Después del tratamiento, 11 hemoglobina y glóbulos rojos se redujeron significativamente (P = 0,032, 0,026), lo que indica que el paciente tuvo anemia durante el tratamiento.Se observó un aumento de PLT después del tratamiento, pero no fue significativo (p = 0,183) (tabla 2).Se cree que la disminución de las subpoblaciones de linfocitos y células T está relacionada con el agotamiento de las células y la apoptosis cuando se acumulan en los sitios inflamatorios que combaten el virus.O bien, pueden haber sido consumidos por la secreción excesiva de citocinas y proteínas inflamatorias.8, 14, 27-30 Si los subconjuntos de linfocitos y células T son persistentemente bajos y la relación CD4+/CD8+ es alta, el pronóstico es malo.29 En nuestra observación, los linfocitos y los subconjuntos de células T se recuperaron después del tratamiento y los 52 casos se curaron (Tabla 1).Se observaron niveles altos de neutrófilos, NLR y CRP antes del tratamiento y luego disminuyeron significativamente después del tratamiento (P = 0,004, 0,011 y 0,017, respectivamente) (Tabla 2).La función de los subconjuntos de células T en la infección y la respuesta inmunitaria se informó anteriormente.29, 31-34
Como el número de pacientes graves y en estado crítico es demasiado pequeño, no realizamos un análisis estadístico de los parámetros entre pacientes graves y en estado crítico y pacientes moderados.Los subconjuntos de células T (CD3+, CD4+, CD8+) y los linfocitos totales de los pacientes graves y en estado crítico son significativamente más bajos que los de los pacientes moderados.Los niveles de neutrófilos, NLR, PCT y CRP en pacientes graves y críticos fueron significativamente más altos que los de pacientes moderados (P = 0,005, 0,002, 0,049 y 0,002, respectivamente) (Tabla 3).Los cambios en los parámetros de laboratorio están relacionados con la gravedad de COVID-19.35.36 La causa de la basofilia no está clara;esto puede deberse al consumo de alimentos mientras se combate el virus en el sitio de infección similar a los linfocitos.35 El estudio encontró que los pacientes con COVID-19 grave también tenían eosinófilos reducidos;14 Sin embargo, nuestros datos no mostraron que este fenómeno pueda deberse al pequeño número de casos graves y críticos observados en el estudio.
Curiosamente, encontramos que en pacientes graves y en estado crítico, existe una correlación positiva entre los valores de PT, ALT y AST, lo que indica que se produjo daño en múltiples órganos en el ataque del virus, como se menciona en otras observaciones.37 Por lo tanto, pueden ser nuevos parámetros útiles para evaluar la respuesta y el pronóstico del tratamiento de la COVID-19.
Un análisis posterior mostró que los CD3+, CD8+, linfocitos totales, plaquetas y basófilos de los pacientes mayores de 50 años fueron significativamente más bajos que los de los pacientes menores de 50 años (P = P = .049, .018, .019, .010 y . 039, respectivamente), mientras que los niveles de neutrófilos, NLR, CRP y RBC RDW en pacientes mayores de 50 años fueron significativamente más altos que los de pacientes menores de 50 años (P = 0,0191, 0,015, 0,009 y 0,010). , respectivamente) (Cuadro 4) .Estos resultados son similares a los informes anteriores.14, 28, 29, 38-41 La disminución de las subpoblaciones de células T y las proporciones elevadas de células T CD4+/CD8+ están relacionadas con la gravedad de la enfermedad;los casos de ancianos tienden a ser más graves;por lo tanto, se consumirán más linfocitos en la respuesta inmune o se dañarán gravemente.Asimismo, un RBC RDW más alto indica que estos pacientes han desarrollado anemia.
Los resultados de nuestra investigación confirman además que los parámetros hematológicos son de gran importancia para una mejor comprensión de los cambios clínico-patológicos de los pacientes con COVID-19 y para mejorar la orientación del tratamiento y el pronóstico.
Liang Juanying y Nong Shaoyun recopilaron datos e información clínica;Jiang Liejun y Chi Xiaowei realizaron análisis de datos;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo y Xiaolu Luo realizaron análisis de rutina;Huang Huayi fue responsable de la concepción y redacción.
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Hora de publicación: 22 de julio de 2021